工业三聚磷酸钠—氮的氧化物含量的测定(3，4一二甲苯酚分光光度法)

    本方法参照标准GB 9984.10—1988。该标准规定了工业用三聚磷酸钠(包括食品工业用)氮的氧化物含量的测定3，4一二甲苯酚分光光度法。

    该标准适用于以氮(N)计的氧化物含量等于或大于2mg／kg的产品。

(一)方法概述

    用高锰酸钾将试样中三价氮氧化成五价氮。五价氮与34二甲苯酚在规定条件下反应生成硝酸盐的衍生物。蒸馏硝酸盐的衍生物并用氢氧化钠溶液吸收。在波长约435nm处对黄色的硝基苯酚进行分光光度测量。

(二)仪器和试剂

    (1)水浴能控制在(35±1)℃。

    (2)蒸馏装置带有24／39锥形磨口玻璃接头和下列部件(见图1)。

图1蒸馏装置

    ①蒸馏烧瓶  容积为250ml。

    ②回收弯头  75⁰角。

    ③李比希式冷凝器水循环，有效长度约450mm，与回收弯头相接。

    (3)分光光度计。

    (4)乙酸高汞(HG 31096)。

    (5)硫酸(GB 625)约80％(质量分数)的溶液  将800ml硫酸(密度约1.84g／ml)小心加入到200ml水中，并加热至放出白烟以除去硫酸中氮的氧化物。冷却，将此发烟酸加入到另外的200ml水中，并再次加热至发烟。再重复一次稀释和发烟。冷却，在搅拌下将该硫酸750ml加入到250ml水中。

    (6)3，4一二甲苯酚，50g／L醋酸溶液取3，4.二甲苯酚5g溶解于冰醋酸中，并用冰醋酸稀释至l00ml。此溶液在低于5℃下贮存。

    (7)高锰酸钾(GB 643)约16g／L溶液。

    (8)氢氧化钠(GB 629)约80g/L溶液。

    (9)过氧化氢(HG l082)1g／L溶液。

    (10)硝酸钾(GB 647)，相当于每毫升含氮500μg的标准溶液称取预先在120℃干燥2h并在干燥器中冷却了的硝酸钾3.609g，准至0.001g。溶解于少量水中，移入l000ml容量瓶中，稀释至刻度并混匀。lml此标准溶液含氮5μg。

    (11)硝酸钾，相当于每毫升含氮5μg的标准溶液  移取10.0ml标准硝酸钾溶液[500μg (N)／ml]于1000ml容量瓶中，稀释至刻度并混匀。lml此标准溶液含氮5μg。

(三)操作步骤

    1.试验份

    称取试验份约lg，准至0.001g。

    2.空白试验

    按同样程序，应用测定中所用同量全部试剂，在测定的同时作一空白试验。

    3.校正曲线的制作

    (1)光度测量用标准比色溶液的制备

采用光径长度为4cm或5cm的比色池。在7个250ml蒸馏瓶中，按表1体积加入  标准硝酸钾溶液[5μg(N)／ml]。每瓶内容物用水稀释到5ml并作如下处理：

表1 标准硝酸钾溶液添加体积

      将250ml蒸馏瓶置入冰水浴中，各瓶加入0.20g乙酸高汞。然后，在搅拌下一小部分一小部分地缓缓加入l5ml硫酸溶液(80％)，使温度始终不超过35℃。逐滴加高锰酸钾溶液(16g／L)，其量应能使溶液转为稳定数分钟的粉红色，再逐滴滴加过氧化氢溶液(1g／L)使溶液脱色。从水浴上取下烧瓶，加入3，4一二甲苯酚醋酸溶液(50g／L)lml，搅拌并将烧瓶置入水浴，控制温度(35±1)℃，不时地搅拌。30min后，在搅拌下小心加水l00ml。

    (2)蒸馏  将烧瓶与装置相连接上，加热至沸后在约15min内收集30ml馏出物于一盛有10ml氢氧化钠溶液(80g／L)的50ml容量瓶中。停止冷凝水的循环，并再蒸出几毫升。将盛有蒸馏物的容量瓶冷却到室温，稀释至刻度并混匀。

    (3)分光光度测量  l5min后用分光光度计在最大吸收波长(波长约435nm)处进行测量，仪器要在补偿溶液校正到零点吸收后方可进行。

    (4)曲线图的绘制  以50ml标准溶液中的含氮(N)量(μg)为横坐标，相应的吸光度值为纵坐标作图。

    4.测定

    (1)试液的制备

    ①如试验份中含有2～25μg以氮(N)计的氮的氧化物，可直接置入蒸馏瓶，加水5ml后，按(三)4.(1)③进行。

    ②如试验份含氮的氧化物量(以N计)超过25μg，可先溶于水，然后定量转移此溶液于一容积适宜的容量瓶中，稀释至刻度并混匀。该溶液每5ml应含有2～25μg (N)。将此溶液5.0ml移入蒸馏瓶中后按(三)4.(1)③进行。

    ③将蒸馏瓶及内容物放人冰水浴并加入0.200g乙酸高汞。然后在搅拌下非常缓慢地一小部分一小部分加入l5ml硫酸溶液(80g／L)，务使温度始终不超过35℃。逐滴加高锰酸钾溶液(16g／L)至出现的粉红色稳定数分钟。然后逐滴加入过氧化氢溶液(1g／L)使溶液脱色。从冰水浴上取下烧瓶，加入3，4，二甲苯酚醋酸溶液(50g／L)lml，搅拌并置烧瓶于水浴上，控制于(35±1)℃。不断地搅拌，30min后，在搅拌下向烧瓶内小心加入l00ml水。