脂肽

    1．菌株、培养基和培养条件

    地衣芽孢杆菌(Bacullus licheniformis)NK—X3，自制分离并保藏。

    (1)种子培养基  蔗糖2％，NH₄Cl 0．6％，MgS0₄0.02％，CaC1₂0．008％，KH₂P0₄0．41％，Na₂HP0₄1．4％，EDTA 0．015％；酵母粉0．05％，pH值为7．5。

    (2)发酵培养基  除用淀粉代替蔗糖外，其他成分同种子培养基，500mL锥形瓶装200mL培养基，l21℃下灭菌30min。接种后置于200r／rain旋转式摇床，在37℃下培养48h。

    2．菌株的发酵

    菌株在摇瓶发酵过程中，定时取样，在菌体生长平衡期(32～48h)，表面活性剂产量达到l．89／L并维持稳定，表面张力达到最低。  

    3．表面活性剂的提取和纯化

    取37℃培养42h的发酵液，以8000r／min离心20min除菌体两次，上清液用浓HCl调pH值至2．0，出现絮状沉淀，静置过夜。以10000r／rain离心30rain，收集沉淀，用pH值为2．0的酸水洗涤一次，随后将该沉淀溶于NaOH溶液，使最终pH值为7．0，冷冻干燥，得浅褐色疏松状固体，为表面活性剂粗品。纯化时用CH₂C_l2抽提后减压蒸干，用稀NaOH溶液溶解，形成多泡液体，表面张力为35mN／m，用Whatman N0．4滤纸过滤，滤液再次加HCl调pH值至2．0。将得到的沉淀离心，得米黄色沉淀物，真空干燥去除残留水分后即为纯品。